1、母种培养:1、麦芽糖酵母琼脂培养基(MYA)大豆蛋白胨(豆胨)1克、酵母2克、麦芽糖20克、琼脂20克,加水至1000毫升。2、马铃薯葡萄糖酵母琼脂培养基(PDYA)马铃薯300克(加水1500毫升,煮20分钟,用滤汁)、酵母2克、豆胨1克、葡萄糖10克、琼脂20克,加水至1000毫升。3、燕麦粉麦芽糖酵母琼脂培养基(DMYA)燕麦粉80克、麦芽糖10克、酵母2克、琼脂20克,加水至1000毫升。
2、原种和栽培种培养基:1、小麦秆或裸麦秆,切碎(长2—3厘米),泡湿,装瓶,高压灭菌后备用。2、小麦、裸麦,高粱、玉米、小米等谷粒浸泡,煮透至没有白芯但表皮不破,加2%碳酸钙,装瓶,高压灭菌后备用。3、木屑和小木片各40%、麸皮20%,制作栽培种培养基。
3、接种:可以用培养3—4天的液体菌种接种。若用固体菌种必须加大接种量(菌种/培养料),接种量最少10%,最好15%—20%。
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4、培养:接种后,把菌种瓶或袋放在20—28℃培养室中培养。大球盖菇菌丝生长几天后,菌丝生长速度会逐渐缓慢,加速菌丝生长的方法是搅拌。用液体菌种接种的无菌麦粒培养基,每隔3—7天摇瓶一次,把菌丝摇断,可以刺激菌丝再生,能保证菌丝生长旺盛。