1、利用基因重组的技术进行基因敲除,根据目的基因序列设计合成出同源基因片段,利用基因打靶技术将携带同源基因片段的基因打靶载体,用电穿孔的技术导入同源的胚胎干细胞中,利用同源基因片段取代靶基因,达到基因敲除的目的。
2、筛选出基因打靶成功的细胞,用选择性培养基筛选出基因打靶成功的细>
2、筛选出基因打靶成功的细胞,用选择性培养基筛选出基因打靶成功的细胞。
3、将打靶成功的细胞导入小鼠体内,观察表形。将打靶成功的细胞导入小鼠囊胚中,再将囊胚导入假孕小鼠体内,发育成为基因敲除的小鼠,观察目的基因改变后的小鼠的生物学性状改变,达到验证目的基因功能的目的。
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