划线的形式有多种,可将一个平板分成四个不同面积的小区进行划线,第一区(A区)面积最小,作为待分离菌的菌源区,第二和第三区(B、C区)是逐级稀释的过渡区,第四区(D区),则是关键区,使该区出现大量的单菌落以供挑选纯种用。为了得到较多的典型单菌落,平板上四区面积的分配应是D>C>B>A。
注意事项:
平板不能倒得太薄,最好在使用前一天倒好。为防止平板表面产生冷凝水,倒平板前培养基温度不能太高。用于平板划线的培养基,琼脂含量宜高些,否则会因平板太软而被划破。用于划线的接种环,环柄宜长些,环口应十分圆滑,划线时环口与平板间的夹角宜小些,动作要轻巧,以防划破平板。为了取得良好的划线效果,可事先用圆纸垫在空培养皿内画上4区,并用接种环练习划线动作,待通过模拟试验熟练操作和掌握划线要领后,再正式进行平板划线。
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