富集培养,取约1克土样加入装有牛肉膏蛋白胨液体培养基的三角瓶中,置于80至90℃水浴加热10至15分钟,然后经30℃振荡培养24小时;初筛平板涂布分离,将培养液再经一次热处理,适当稀释后,取0.1毫升,涂布在酪蛋白平板上,30℃培养24至48小时;平板菌落的转接培养,将酪蛋白平板上长出的透明圈平板上长出的透明圈直径与菌落直径比值较大的菌落,编号依次对应接到牛肉膏蛋白胨培养基斜面上,30℃培养24至48小时,备用;摇瓶发酵,将酪蛋白平板上长出的透明圈直径与菌落直径比值较大的菌落进行发酵,并测定酶活;纯化与保藏,将酶活高的菌株采用划线分离法或涂布分离法进一步纯化,然后将菌种进行保藏。
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